Characterization of digestive enzymes from captive Brazilian flounder Paralichthys orbignyanus / Caracterização de enzimas digestivas do linguado brasileiro de cativeiro Paralichthys orbignyanus

Abstract Knowledge of specific enzyme activity, along with animal habits and digestive capacity is essential in formulating an appropriate diet for any species. In this study, we evaluated and characterized the activity of digestive enzymes present in the liver, intestine, and stomach of Paralichthys orbignyanus. The effects of pH and temperature on enzyme activity were also evaluated via the use of specific substrates. The use of specific substrates and inhibitors showed strong evidence of the presence of trypsin (BApNA= 0.51 ± 0.2 mU mg-1), chimotrypsin (SApNA= 2.62 ± 1.8 mU mg-1), and aminopeptidases (Leu-p-Nan =0.9709 ± 0.83 mU mg-1) in the intestine. Optimum pH for the activity of trypsin, chemotrypsin, leucino aminopeptidase, amilase, and pepsin were 9.5, 9.0, 8.0, 7.5, and 3.5, respectively, while optimum temperatures were 50, 50, 50, 40, and 45 °C, respectively. These results provide additional information regarding the biology of Brazilian flounder and can be used as a basis for further studies regarding fish feeding physiology.

Resumo O conhecimento da atividade enzimática é essencial para formular uma correta dieta específica para espécie, além de estarem correlacionadas com o hábito da alimentação e capacidade digestive. Neste estudo determinamos e caracterizamos a atividade enzimática presente no intestino, estômago e fígado do linguado Paralichthys orbignyanus. Os efeitos da temperatura e pH sobre a atividade enzimática também foram avaliados utilizando substratos específicos. O uso de substratos e inibidores específicos mostrou uma forte evidência da presença da tripsina (BApNA = 0,51 ± 0,2 mU mg-1), quimotripsina (SAPNA = 2,62 ± 1,8 mU mg-1), e as aminopeptidases (Leu-p-Nan = 0,97 ± 0,83 mU mg-1) no intestino. O pH ótimo observado para a atividade de tripsina, quimotripsina, leucino aminopeptidase, amilase e pepsina foi 9,5, 9,0, 8,0, 7,5 e 3,5, respectivamente. A temperatura ótima observada foi 50, 50, 50, 40 e 45 °C, respectivamente. Estes resultados fornecem informações adicionais sobre a biologia do linguado brasileiro e pode ser usado como base para novos estudos sobre fisiologia alimentar.

Hemangioma esclerosante mandibular em Paralichthys orbignyanus: relato de caso / Sclerosing hemangioma mandibular in Paralichthys orbignyanus: case report

Neste trabalho, descreveu-se o primeiro caso de hemangioma esclerosante registrado em um exemplar adulto do linguado Paralichthys orbignyanus. Produzido a partir de reprodução artificial, o peixe em questão tinha aproximadamente 10 anos de idade e fazia parte de um plantel de reprodutores. Ao ser retirado do tanque, notou-se a presença de lesão mandibular com escoriações e focos hemorrágicos. Amostras do tumor foram coletadas da mandíbula para análise histopatológica. Microscopicamente foi observada uma proliferação de numerosos vasos sanguíneos rodeados por um estroma conectivo denso. A etiologia dessa neoplasia é desconhecida, mas o fato de o exemplar ter permanecido por muitos anos em cativeiro pode ter contribuído para o surgimento desse tipo de lesão, devido aos choques mecânicos contra a parede do tanque que acontecem esporadicamente.(AU)

In this study, we described the first case of sclerosing haemangioma in an adult Brazilian flounder Paralichthys orbignyanus. Produced by artificial reproduction, the fish was approximately 10 years old and was maintained at a breeding stock. When removed from the tank, mandibular lesion with excoriations and hemorrhagic foci were noted. Tumor samples were collected from the mandible for histopathological analysis. Proliferation of numerous blood vessels surrounded by dense connective stroma was observed microscopically. The etiology of this neoplasia is unknown, but the fact that the specimen remained in captivity for many years, may have contributed to the appearance of this type of lesion, due to sporadic mechanical shocks to the tank wall.(AU)

Crescimento e metabolismo do nitrogênio em juvenis de Trachinotus marginatus alimentados com diferentes níveis proteicos / Growth and nitrogenous metabolism of juveniles Trachinotus marginatus feeding with differently protein levels

O objetivo deste trabalho foi avaliar o crescimento e alterações no metabolismo do nitrogênio, além da composição do fígado e do músculo de juvenis de pampo Trachinotus marginatus alimentados com 43, 54 ou 64% de proteína bruta (PB43, PB54 e PB64, respectivamente). Grupos de 10 juvenis (1,47±0,14g) foram estocados em nove tanques de 50L, em sistema de recirculação de água marinha, durante 55 dias, alimentados quatro vezes ao dia com as rações pré-definidas. O ganho em peso, a taxa de crescimento específico e a conversão alimentar não apresentaram diferença significativa (P>0,05). Contudo, o acréscimo de proteína consumida aumentou o índice hepatossomático e a taxa de excreção de amônia pós-prandial, bem como diminuiu a retenção proteica. Os peixes alimentados com a dieta PB43 apresentaram menor concentração da transaminase glutâmico oxalacética hepática, além de menor concentração de triglicerídeos no músculo e fígado (P<0,05). A composição da carcaça, o teor de glicogênio e de proteínas totais para músculo e fígado não mostraram diferenças significativas (P>0,05), excetuando o maior teor de lipídios da carcaça no tratamento PB43. Concluímos que a melhor utilização da proteína por juvenis de pampo é observada quando eles são alimentados com uma dieta contendo 43% de proteína.

The experiment aimed to evaluate the growth, the nitrogen metabolism and liver and muscle composition of juvenile pompano Trachinotus marginatus fed with different protein levels (PB43, PB54, PB64). Groups of 10 juveniles (1.47±0.14g) were stocked in nine tanks with 50L in a marine recirculating aquaculture system during 55 days. Fish were fed four times a day. The weight gain, specific growth rate and feed conversion rate did not present significant differences (P>0.05). However, the increase in protein consumption augmented the hepatosomatic index, the pos prandial ammonia excretion rate and reduced the protein efficiency rate. Fish fed with PB43 presented lower hepatic glutamic oxaloacetic transaminase and lower concentration of triglycerides in muscle and liver (P<0.05). Carcass composition, glycogen and muscle and liver protein content did not present significant differences (P>0.05), with the exception of the lipid content in fish carcass fed with PB43. It is concluded that the better protein utilization in juvenile pompano is observed when they are fed with 43% protein.

Yersiniose em Trachinotus marginatus (pampo): diagnóstico histopatológico e imuno-histoquímico / Yersiniosis in Trachinotus marginatus (pampo): histopathological and immunohistochemical diagnostic

Descreveu-se um surto de yersiniose em uma criação de pampo Trachinotus marginatus estudado no Laboratório de Piscicultura Estuarina e Marinha da Universidade Federal do Rio Grande. A enfermidade manifestou-se por transtornos natatórios, exoftalmia com panoftalmite e pela clássica boca vermelha, nome pelo qual se denomina "enfermidade da boca vermelha" (EBV). Na necropsia, foram observados focos de hemorragia peritoneal, esplenomegalia e hepatomegalia. Microscopicamente, foi observada panoftalmite com infiltrados inflamatórios densos que afetavam quase todas as estruturas oculares. Esses infiltrados estavam constituídos por granulócitos, linfócitos, macrófagos e células granulares eosinofílicas. No exsudado, observaram-se estruturas pequenas, pouco coradas, de aspecto bacteriano Gram negativo. O estudo imuno-histoquímico, que se utilizou de um anticorpo monoclonal anti-Yersinia ruckeri, resultou positivo. Este é o primeiro surto conhecido de yersiniose em Trachinotus marginatus no Brasil.

In the "Laboratório de Piscicultura Estuarina e Marinha da Universidade Federal do Rio Grande" the rearing of Trachinotus marginatus (pompano) is studied, and in one of these rearing a yersioniosis outbreak occured. The disease was manifested by swimming disturbances, exophthalmiawith panophthalmitis and the classic red mouth, (red mouth disease (RMD). The necropsies revealed focus of peritoneal hemorrhage, esplenomegalyand hepatomegaly.Microscopically a panophthalmitis with dense inflammatory infiltrates was observed, which affected almost all ocular structures. These infiltrates were constituted by granulocytes, lymphocytes, macrophages and eosinophylicgranular cells (ECG), in the exudatessmall structures less colored with Gram negative bacteria aspect were observed. The immunohistochemical, which used a monoclonal antibody anti- Yersinia ruckeri waspositive. The RMD is caused by enterobacteriaGram negative, which affects both freshwater and saltwater fish, with predominance in salmonids. This is the first known yersiniosis outbreak in Trachinotus marginatus in Brazil and it is necessary to keep this disease in mind at the moment of rearing fish of this species.

Clonagem e avaliação da expressão gênica do sbGnRH em machos juvenis e adultos de linguado, Paralichthys orbignyanus / Cloning and evaluation of sbGnRH gene expression in juvenile and adult males of Brazilian flounder Paralichthys orbignyanus

Este estudo buscou clonar o cDNA do sbGnRH, identificar sua expressão em diferentes tecidos do linguado, bem como avaliar possíveis diferenças no RNA mensageiro (RNAm) desse gene no cérebro de linguados machos juvenis e adultos. Por meio da RT-PCR, demonstrou-se pela primeira vez, a clonagem da região codificadora do sbGnRH contendo 297 nucleotídeos do cérebro do linguado. A expressão do sbGnRH foi detectada em vários tecidos periféricos. Foram detectados níveis mais elevados de RNAm do sbGnRH no hipotálamo dos animais adultos. Estes resultados sugerem que o sbGnRH está envolvido na puberdade do linguado.

The objectives of this study were to clone sbGnRH cDNA, evaluate the mRNA levels in different tissues of flounder, and also evaluate brain sbGnRH expression in juvenile and adult males. Using RT-PCR the cloning of a 297 nucleotides coding region of sbGnRH from Brazilian flounder brain was demonstrated for the first time. Expression of sbGnRH was detected in several peripheral tissues. Brain gene expression in the adult flounder was higher than those found in juvenile. These results suggest that sbGnRH is involved on the Brazilian flounder puberty.